DETERMINACIÓN SÉRICA DEL GRUPO ABO

OBJETIVOS

• Determinar el grupo sérico del sistema ABO.
• Detectar los anticuerpos (AC) dirigidos contra los antígenos del sistema ABO presentes en el suero.

MATERIAL

• Tres tubos de hemólisis, tubos pequeños, gradilla y parafilm.
• Portaobjetos, cubreobjetos y pipetas de Pasteur desechables.
• Centrifuga, visualizador y microscopio.
  

REACTIVOS

• SF.
• Hematíes tipificados del grupo A, grupo B y grupo AB como control positivo.
• Hematíes procedentes de la sangre-problema para control negativo (C).

 MUESTRA

• Suero problema.

PROCEDIMIENTOS

PROCEDIMIENTO 1: PREPARACIÓN DE HEMATÍES TIPADOS A, B y AB

1. Seleccionar 3 muestras de sangre pertenecientes a los grupos A, B y AB.
2. Identificar 3 de tubos hemólisis con las letras A, B y AB.
3. Poner en los tubos de hemólisis 0,5 ml de sangre de cada una de las muestras A, B y AB.
4. Llenar hasta arriba los tubos de SF y tapar con parafilm; agitar para que se mezcle bien la sangre con el SF.
5. Centrifugar durante 5 min a 2500 rpm.
6. Extraer el sobrenadante de cada tubo con una pipeta de Pasteur especial para cada uno de ellos.
7. Repetir los 3 pasos anteriores 2 veces más.   
8. Del sedimento de hematíes obtenido del último lavado y centrifugación de cada uno de los tubos A, B y AB, coger con una micropipeta 0,1 ml y depositarlo en 3 tubos pequeños identificados con A, B y AB.
9. Añadir 1,9 ml de SF a cada uno de los tubos.
10. Taparlos con papel parafilm y guardarlos en la nevera hasta su utilización.
    
    
    
    
      

PROCEDIMIENTO 2: DETERMINACIÓN SÉRICA DEL GRUPO ABO

1. Identificar 4 tubos pequeños con las letras A, B, AB y C.
2. Añadir con una pipeta de Pasteur 3 o 4 gotas del suero problema en cada uno de ellos.
   
3. Añadir 3 o 4 gotas de los hematíes tipados anteriormente A, B y AB y de los hematíes control C en sus tubos correspondientes.
   
4. Mezclar bien mediante agitación suave.
5. Centrifugar a 2500 rpm durante 1 min.
6. Proceder a la observación de la aglutinación de los tubos en el visualizador, y si es preciso, en el microscopio.
   
   
   
   

RESULTADOS
LECTURA DE RESULTADOSObservación de las aglutinación en el tubo: debe golpearse suavemente en el fondo de los tubos con los dedos índice y medio para despegar los hematíes y observar mejor la aglutinación:

• Presencia de aglutinación (+): se forman grumos de color rojo en un líquido claro.
• Ausencia de aglutinación (-): los hematíes se resuspenden homogéneamente al golpear el fondo del tubo.

	TUBO A	TUBO B	TUBO AB	TUBO C
Aglutinación en tubo	+	+	+	-

Aglutina A y B porque mi grupo sanguíneo es 0, por lo que tengo Ac A y Ac B.
El control de hematíes (C) siempre tiene que dar negativo.